Eddie Acuff urodził się 3 czerwca 1903 roku w Caruthersville w stanie Missouri w Stanach Zjednoczonych. Karierę aktorską rozpoczął na scenie teatralnej, gdzie występował w zespołach repertuarowych oraz na Broadwayu. Jednym z ważnych etapów jego drogi zawodowej był udział w oryginalnej obsadzie sztuki „The Petrified Forest” (1935), która przyciągnęła uwagę środowiska filmowego i otworzyła mu drogę do Hollywood. Doświadczenie sceniczne oraz charakterystyczny sposób mówienia sprawiły, że dobrze odnalazł się w kinie dźwiękowym. Do filmu trafił w połowie lat 30., szybko stając się jednym z najbardziej zapracowanych aktorów epizodycznych swojej epoki. W trakcie kariery wystąpił w ponad 300 produkcjach filmowych, co stawia go w gronie rekordzistów pod względem liczby występów w klasycznym Hollywood. Specjalizował się w rolach drugoplanowych i epizodycznych, często wcielając się w żołnierzy, marynarzy, mechaników oraz postacie o ludowym, bezpośrednim charakterze, wykorzystując swój południowy akcent i naturalną swobodę gry. Najbardziej rozpoznawalnym elementem jego dorobku była rola listonosza, pana Beasleya, w popularnej serii filmów „Blondie”, gdzie zastąpił Irvinga Bacona. Występy w tej serii przyniosły mu dużą rozpoznawalność wśród widzów lat 40. i utrwaliły jego ekranowy wizerunek jako sympatycznego, gadatliwego przedstawiciela codziennego życia amerykańskiej klasy średniej. W późniejszych latach kariery pojawiał się również w produkcjach telewizyjnych, występując m.in. w serialach „I Love Lucy” oraz „The Gene Autry Show”. Pozostał aktywny zawodowo aż do połowy lat 50., konsekwentnie budując swoją pozycję jako niezawodny aktor charakterystyczny. Zmarł 17 grudnia 1956 roku w Hollywood w Los Angeles w stanie Kalifornia na skutek ataku serca. Eddie Acuff zapisał się w historii kina jako jeden z najbardziej pracowitych i rozpoznawalnych aktorów epizodycznych Złotej Ery Hollywood, którego obecność – choć często drugoplanowa – stanowiła istotny element budujący realizm i rytm klasycznych produkcji filmowych.